Xả súng tại hộp đêm ở Orlando 2016 hay Vụ thảm sát hộp đêm Orlando[6][7][8] là vụ tấn công khủng bố nhắm vào người đồng tính ở hộp đêm đồng tính nam Pulse, nằm tại Orlando, Florida, Mỹ. Vụ tấn công diễn ra vào lúc 2 giờ sáng ngày 12 tháng 6 năm 2016 và kết thúc lúc 5 giờ sáng cùng ngày (giờ địa phương). 39 người thiệt mạng, 53 người bị thương, 30 con tin được giải cứu, 1 cảnh sát SWAT bị thương, thủ phạm duy nhất bị cảnh sát SWAT tiêu diệt tại chỗ. Thủ phạm được xác định là Omar Mir Seddique Mateen, 29 tuổi, người Mỹ gốc Afghanistan.[9][10][11]Truyền thông Mỹ cho rằng Mateen có liên hệ với Nhà nước Hồi giáo Iraq và Levant và vụ tấn công là vì động cơ tôn giáo.[12][13] Cha của Mateen bác bỏ ý kiến này, ông nói Mateen vốn ghét đồng tính, tôn giáo không phải động cơ.[14][15]Vụ xả súng này xảy ra chỉ một ngày sau khi một tay súng khác đã bắn chết nữ ca sĩ nổi tiếng Christina Grimmie sau một buổi hòa nhạc có sự tham gia trình diễn của nữ ca sĩ này tại một trung tâm giải trí cũng tọa lạc trong thành phố Orlando, tạo nên một làm sóng phẫn nộ mạnh mẽ trong dư luận.[16][17] Đây là vụ tấn công xả súng thảm khốc nhất lịch sử Hoa Kỳ,[22] vụ tấn công chống lại cộng đồng LGBT Mỹ đẫm máu nhất[23] và là vụ khủng bố làm chết nhiều người nhất xảy ra tại Mỹ kể từ sự kiện 11 tháng 9 năm 2001.[24][25]